バクテリアの塗抹標本をどのように準備しますか?
質問者:Erick Pahunov |最終更新日:2020年2月5日
カテゴリ:科学生物科学
塗抹標本の準備
- 固体細菌増殖の1本の針または2つのループを配置します。きれいなスライドの中央での液体細菌の増殖の。
- 固体培地から作業する場合は、1滴(および1滴のみ)を追加します
- 次に、白金耳で標本を水と混合します。
- スライドをスライドウォーマーに置き、乾くのを待ちます。
- きれいなスライドガラスを平らな面に置きます。片方の端に少量の血液を1滴加えます。
- 別のきれいなスライドを取り、約45度の角度で保持し、スライドの一方の端で血液に触れて、毛細管現象によって血液がスライドの端に沿って流れるようにします。
- 2つの塗抹標本を作成し、風乾させて、はっきりとラベルを付けます。
続いて、質問は、細菌をスライドに固定する他の方法は何ですか?スライドにバクテリアを付着させるには、熱固定またはメタノール固定の2つの方法があります。熱固定はBSL1生物でのみ使用されます。使用する生物はBSL2であるため、メタノール固定技術を使用する必要があります。
第二に、なぜ染色する前に細菌の塗抹標本を風乾して加熱するのですか?
バクテリアを染色する前に、スライド上にバクテリアの塗抹標本を作成し、熱固定する必要があります。熱固定は細菌の酵素を変性させ、細胞の一部を消化するのを防ぎます。これにより、細胞が破壊されます。これは自己消化と呼ばれるプロセスです。熱はまた、スライドへの細菌細胞の付着を強化します。
細菌の塗抹標本を過熱するとどうなりますか?
スミアが熱定着中に過熱した場合、細胞壁が破裂します。試薬の濃度と鮮度は、染色の品質に影響を与える可能性があります。ステップ間の塗抹標本の洗浄と乾燥は一貫している必要があります。スライドに残った過剰な水は試薬、特にグラムヨウ素を希釈します。
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塗抹標本の目的は何ですか?
塗抹標本の準備。グラム染色を含む多くの実験手順では、塗抹標本の準備が必要です。塗抹標本を作成する目的は、細菌をスライドに固定し、染色手順中にサンプルが失われるのを防ぐことです。塗抹標本は、固形培地またはブロス培地から調製することができます。
熱固定はバクテリアを殺しますか?
熱固定により、塗抹標本内のバクテリアが死滅し、塗抹標本がスライドにしっかりと付着し、サンプルが汚れをより簡単に吸収できるようになります。
単純染色の目的は何ですか?
単純な染色は、細胞の形状、サイズ、および配置を決定するために使用できます。その名の通り、単純染色は、1つの染色のみを含む非常に単純な染色手順です。ほとんどの細菌細胞の表面は負に帯電しているため、これらの正に帯電した汚れは細胞表面に容易に付着します。
未染色の細菌検体を観察することにはどのような利点がありますか?
利点。明視野顕微鏡は非常に使いやすく、標本を表示するために必要な調整が少なくて済みます。一部の標本は染色せずに見ることができ、明視野技術で使用される光学系は標本の色を変えません。
なぜマイコバクテリアは抗酸菌なのですか?
これらの抗酸菌-マイコバクテリウムのような高速生物は、ミコール酸と呼ばれる細胞壁内に大量の脂質物質を含んでいます。これらの酸は、グラム染色などの通常の方法による染色に耐性があります。また、ノカルディアなどの他のいくつかの細菌を染色するために使用することもできます。酸は-高速菌は染色した後の明るい赤です。
なぜ細菌の塗抹標本を染色するのですか?
細菌は、ほとんどの部分は、透明、私たちは顕微鏡観察のためにそれらの色を与えるために汚れを使用しているため。細菌塗抹標本を作成することは、染色される細菌を準備し、ほとんどの染色手順の最初のステップです。
微生物学の染みとは何ですか?
染色は、一般的に顕微鏡レベルで、サンプルのコントラストを高めるために使用される手法です。生物学的染色は、フローサイトメトリーで細胞をマークしたり、ゲル電気泳動でタンパク質や核酸にフラグを立てたりするためにも使用されます。
良い血液塗抹標本の特徴は何ですか?
光を反射するとき、それは虹の光沢を持っているべきです。塗抹標本は、スライドの全長にわたって滑らかで、穴、線、またはざらざらした外観がないようにする必要があります。スライドは、顕微鏡で見たときに羽毛のある縁がちょうど1細胞の厚さの血液塗抹標本で構成されています。
直接塗抹標本とは何ですか?
直接糞便塗抹技術は、感染した被験者が糞便を通過する腸内寄生虫の検出を容易にするための最も簡単で簡単な技術です。少量の新鮮な糞便を生理食塩水(原生動物の運動性を検出するため)またはルゴール/ヨウ素溶液(寄生虫の構造を明らかにするため)のいずれかと混合します。
アルコールは血液塗抹標本をどのように修正しますか?
血液塗抹標本は、無水メタノールまたはエタノールに30秒間浸すことによって修正されます。
厚い塗抹標本を止めるにはどうすればよいですか?
厚い塗抹標本を高温環境から保護して、塗抹標本の熱固定を防ぎます。厚い塗抹標本をメタノールや熱で固定しないでください。塗抹標本の染色が遅れる場合は、厚い塗抹標本を水に短時間浸して赤血球を溶血させます。
血液塗抹標本をどのように染色しますか?
次に、乾燥した塗抹標本をメタノールまたはエチルアルコールで固定し、染色します。塗抹標本を約10分間染みで覆い、次に水で希釈し、細胞が適切に染まるまでさらに10分間待ちます。染みをつけた後、スライドを流水ですすいでください。
染色用の塗抹標本をどのように準備しますか?
塗抹標本の準備は次のとおりです。
- ブロスから:冷却された滅菌ループを使用して、ループ状のブロスをスライド上に置き、直径約1cmまで円を描くように広げます。
- プレーティングされた培地から:スライド上に滅菌水または生理食塩水を一滴垂らします。染色する孤立したコロニーを選択します。
スミアを作成するには、スプレッダースライドをどの角度で保持する必要がありますか?
スプレッダースライドを30〜40度に保持して、最適なスミア長を実現します。拡散動作全体を通して均一な接触を維持します。短い塗抹標本•より大きな血液の液滴を使用します。スプレッダースライドの角度を小さくします。
血液塗抹標本をどのように調べますか?
血液塗抹標本の検査
- 微分白血球数を実行し、血球の形態学的特徴を調べるために、より高い倍率で検査するための最適な領域を見つけます。
- 白血球が塗抹標本全体に均一に分布しており、羽毛のある縁に過度に集中していないことを確認します。
塗抹標本はどのように行われますか?
パパニコロウ塗抹検査はあなたの診療所で行われ、ほんの数分しかかかりません。あなたの医者はあなたの膣に検鏡と呼ばれる器具をそっと挿入します。検鏡はあなたの膣の壁を離して保持するので、あなたの医者はあなたの子宮頸部を簡単に見ることができます。
サフラニンは陽性ですか、それとも陰性ですか?
紫色の染色された細胞はグラム陽性細胞と呼ばれる、結晶バイオレット、レッド一方、-dyed細胞サフラニン(図3)グラム陰性です。