バクテリアの塗抹標本をどのように修正しますか?
質問者:Romualdas Krahfuss |最終更新日:2020年1月25日
カテゴリ:科学生物科学
バクテリアの塗抹標本を熱固定するには、最初にバクテリアのサンプルを風乾させる必要があります。次に、スライドをマイクロ焼却炉のスライドホルダーに入れるか、乾燥したスライドをブンゼンバーナーの炎に3〜4回通し、塗抹面を上に向けます。スライドが熱固定されると、染色することができます。
それでは、バクテリアをスライドに固定する他の方法は何ですか?スライドにバクテリアを付着させるには、熱固定またはメタノール固定の2つの方法があります。熱固定はBSL1生物でのみ使用されます。使用する生物はBSL2であるため、メタノール固定技術を使用する必要があります。
同様に、なぜ細菌の塗抹標本を熱固定するのですか?バクテリアを染色する前に、スライド上にバクテリアの塗抹標本を作成し、熱固定する必要があります。熱固定は細菌の酵素を変性させ、細胞の一部を消化するのを防ぎます。これにより、細胞が破壊されます。これは自己消化と呼ばれるプロセスです。熱はまた、スライドへの細菌細胞の付着を強化します。
それで、どうやってバクテリアの塗抹標本を作りますか?
塗抹標本の準備
- 固体細菌増殖の1本の針または2つのループを配置します。きれいなスライドの中央での液体細菌の増殖の。
- 固体培地から作業する場合は、1滴(および1滴のみ)を追加します
- 次に、白金耳で標本を水と混合します。
- スライドをスライドウォーマーに置き、乾くのを待ちます。
細菌の塗抹標本を過熱するとどうなりますか?
スミアが熱定着中に過熱した場合、細胞壁が破裂します。試薬の濃度と鮮度は、染色の品質に影響を与える可能性があります。ステップ間の塗抹標本の洗浄と乾燥は一貫している必要があります。スライドに残った過剰な水は試薬、特にグラムヨウ素を希釈します。
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固定の種類は何ですか?
固定の種類
物理的方法には、加熱、マイクロウェーブ、および凍結保存(凍結乾燥)が含まれます。熱固定が組織標本に使用されることはめったになく、その適用は微生物の塗抹標本に限定されています。 熱固定はバクテリアを殺しますか?
熱固定により、塗抹標本内のバクテリアが死滅し、塗抹標本がスライドにしっかりと付着し、サンプルが汚れをより簡単に吸収できるようになります。
単純な染みとは何ですか?
単純な染色は、細胞の形状、サイズ、および配置を決定するために使用できます。その名の通り、単純染色は、1つの染色のみを含む非常に単純な染色手順です。メチレンブルー、グラムサフラニン、グラムクリスタルバイオレットなどの基本的な染色剤は、ほとんどの細菌の染色に役立ちます。
未染色の細菌検体を観察することにはどのような利点がありますか?
利点。明視野顕微鏡は非常に使いやすく、標本を表示するために必要な調整が少なくて済みます。一部の標本は染色せずに見ることができ、明視野技術で使用される光学系は標本の色を変えません。
なぜ媒染剤を使うのですか?
媒染剤または染料固定剤は、染料と配位複合体を形成することによって布地に染料を硬化(すなわち結合)するために使用される物質であり、次に布地(または組織)に付着します。過去には、媒染剤が染料が繊維に食い込むのを助け、洗濯中にしっかりと保持されると考えられていました。
塗抹標本を準備するときに少量の細菌のみを使用することが重要なのはなぜですか?
バクテリアの塗抹標本は、スライドの表面の非常に薄いフィルムに少量の培養物が広がっているという単純なものです。染色ステップ中に細菌が洗い流されるのを防ぐために、塗抹標本をスライドの表面に化学的または物理的に「固定」することができます。
バクテリアの永久スライドをどのように準備しますか?
スライドを準備するには:
- スライドの中央に液体を一滴垂らします。
- ピンセットを使用して、サンプルを液体に置きます。
- 斜めに、液滴の外縁と接触するスライドに対してカバースリップの片側を置きます。
- 気泡を避けて、カバーをゆっくりと下げます。
- ペーパータオルで余分な水分を取り除きます。
どのようにして完璧な塗抹標本を作りますか?
- きれいなスライドガラスを平らな面に置きます。片方の端に少量の血液を1滴加えます。
- 別のきれいなスライドを取り、約45度の角度で保持し、スライドの一方の端で血液に触れて、毛細管現象によって血液がスライドの端に沿って流れるようにします。
- 2つの塗抹標本を作成し、風乾させて、はっきりとラベルを付けます。
スミア固定とは何ですか?
熱固定:塗抹標本が室温で乾燥した後、スライドをトングまたは洗濯バサミでつかみ、ブンゼンバーナーの炎を数回通過させて、生物を熱殺菌してスライドに付着させます。バクテリアや古細菌と日常的に使用されます。灌流:血流による固定。
なぜマイコバクテリアは抗酸菌なのですか?
これらの抗酸菌-マイコバクテリウムのような高速生物は、ミコール酸と呼ばれる細胞壁内に大量の脂質物質を含んでいます。これらの酸は、グラム染色などの通常の方法による染色に耐性があります。また、ノカルディアなどの他のいくつかの細菌を染色するために使用することもできます。酸は-高速菌は染色した後の明るい赤です。
微生物学者にとっての塗抹標本とは何ですか?
微生物学-003-細菌の塗抹標本と単純な染色。細菌塗抹標本を作成することは、染色される細菌を準備し、ほとんどの染色手順の最初のステップです。塗抹標本が成功すると、スライドに細菌の単層が固定され、染色して顕微鏡で観察できるようになります。
微生物学の染みとは何ですか?
染色は、一般的に顕微鏡レベルで、サンプルのコントラストを高めるために使用される手法です。生物学的染色は、フローサイトメトリーで細胞をマークしたり、ゲル電気泳動でタンパク質や核酸にフラグを立てたりするためにも使用されます。
白金耳または針を滅菌するのにどのくらい時間がかかりますか?
チューブのキャップを交換して、ラックの上に置きます。ループを炎上させて滅菌します。これで、ラボのベンチに置くか、コンテナに戻すことができます。接種したばかりの培養物を37℃で24〜48時間インキュベートします。
グラム染色はどのように機能しますか?
グラム染色手順では、これらの細胞を赤または紫に着色することにより、グラム陽性菌とグラム陰性菌を区別します。グラム陽性菌は、細胞壁にペプチドグリカンの厚い層が存在するために紫色に染色され、これらの細胞が染色されるクリスタルバイオレットを保持します。
塗抹標本の準備には、他にどのような固定方法を使用できますか?
2一般的に使用される方法は、風乾および湿式固定の塗抹標本です。風乾した塗抹標本は、通常の細胞診において、湿式固定塗抹標本に比べて多くの利点があります。それらは、エタノール/酢酸、95%エタノール、またはアルコール性ホルマリンなどのさまざまな固定剤を含む生理食塩水で再水和した後、後固定することができます。
なぜ私たちは生物を染色するのですか?
細胞が染色される最も基本的な理由は、顕微鏡下での細胞または特定の細胞成分の視覚化を強化することです。細胞を染色して、代謝プロセスを強調したり、サンプル中の生細胞と死細胞を区別したりすることもできます。
ネガティブ染色中に塗抹標本を作成する目的は何ですか?
ネガティブ染色。直接染色とは対照的に結合する細菌に直接、負染色色汚れの背景ではなく細菌。これらの染みは負に帯電した官能基を持っているため、負に帯電したバクテリアに直接結合することはできません。