蛍光源は何ですか？一部の細胞が蛍光を発し、他の細胞が蛍光を発しないのはなぜですか？
質問者：Dialla Serantes |最終更新日：2020年2月15日
カテゴリ：ビジネスおよび金融バイオテクノロジーおよび生物医学産業
細胞は蛍光を発しませんか？蛍光源は、 GFP、緑色蛍光タンパク質に由来します。タンパク質は青色光を吸収し、それに応じて緑色光を放出することができます。このタンパク質はEを可能にします。
続いて、2つの可能な蛍光源は何ですか？私たちの結果を観察した後、今や排除することができる2つの可能な蛍光源があります。これらのソースには、pGLOプラスミドDNAと元の細菌細胞が含まれます。蛍光源はプラスミドからです。 pGLOプラスミドには、形質転換されたEを可能にする緑色蛍光タンパク質が含まれています。
第二に、細胞が有能であるためにはどのような治療が必要ですか？大腸菌細胞は、DNAがより簡単に通過できるように細胞壁が変更されている場合、外来DNAを取り込む可能性が高くなります。そのような細胞は「有能」であると言われています。細胞は、塩化カルシウムと熱ショックを使用するプロセスによってコンピテントセルになります。
また、蛍光源は何ですか？
蛍光源は、おそらくプラスミドがコードするタンパク質に由来します。
コントロールチューブにプラスミドを加えてみませんか？
プレートがコントロールとして機能できるように、プラスミドはコントロールチューブに追加されません。これは、LB / Ampプレートを制御するためのものです。 Q）生物全体を遺伝的に形質転換するには、その生物のすべての細胞に新しい遺伝子を挿入する必要があります。
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なぜ寒天プレートから緑のコロニーと白のコロニーを1つずつ選んだのですか？
細菌コロニーは、単一細胞クローン由来の細菌細胞の大規模なグループまたはクラスタです。寒天プレートから緑色のコロニーと白色のコロニーを1つずつ選んだのはなぜですか？このプレートには、GFP遺伝子の発現を誘導し、緑色蛍光コロニーを生成するアラビノースが含まれています。
アラビノースとは何ですか？このラボでのアラビノースの役割は何ですか？
アラビノース：タンパク質AraCに結合することによりGFPの発現を誘導します。アラビノースは異なる培地を生成します。つまり、pGLO細胞と非pGLO細胞の両方が増殖できますが、外観は異なります（pGLO細胞のみが蛍光を発します）。
実験のこのステップでのペレットは何色でしたか？
これはあなたに何を伝えますか？ -Theペレットを白っぽいであるか、または緑色を淡べきです。上澄みは明るい緑色に蛍光を発するはずです。上清の蛍光緑色は、緑色タンパク質が細菌から放出され、上清中に残ったことを示しています。
抗生物質を含むプレートに、形質転換されたバクテリアの一部をプレートする必要がありますか？
抗生物質を含むプレートに、形質転換されたバクテリアの一部をプレートする必要がありますか？これは、プレート上に表示された抗生物質ース間オン抵抗コロニーは、細胞に取り込まれているプラスミドの結果であることを実証する制御を提供します。プラスミドがない場合は、抗生物質プレート上で増殖しないはずです。
バクテリアを緑色に変えるのはどのような分子ですか？
pGLOプラスミドDNAで形質転換された細菌をアラビノースの存在下で増殖させると、GFP遺伝子がオンになり、UV光にさらされると細菌は鮮やかな緑色に光ります。
形質転換効率とはどういう意味ですか？
形質転換効率は、細胞が細胞外DNAを取り込み、それによってコードされる遺伝子を発現できる効率です。これは、細胞の能力に基づいています。これは、成功した形質転換体の数を、形質転換手順中に使用されたDNAの量で割ることによって計算できます。
形質転換効率に影響を与える要因は何ですか？
形質転換効率に影響を与える要因は、細菌の菌株、細菌コロニーの成長段階、形質転換混合物の組成、および外来DNAのサイズと状態です。
遺伝的に形質転換された生物は、その新しい形質をその子孫に受け継ぐことができますか？
生物全体を遺伝的に形質転換するには、生物のすべての細胞に新しい遺伝子を挿入する必要があります。科学者はしばしば、遺伝的に形質転換された生物がその新しい形質をその子孫と将来の世代に受け継ぐことができるかどうかを知りたいと思っています。
pGLOのPは何の略ですか？
pGLOプラスミドには、起点または複製、選択可能なマーカー、および緑色蛍光タンパク質（GFP）の遺伝子が含まれています。このプラスミドには、アラビノースBADプロモーター（ P BAD ）からの発現を調節するタンパク質であるアラビノースCタンパク質の遺伝子も含まれています。
アラビノースはどのようにGFPを活性化しますか？
アラビノースを代謝する遺伝子と双方向プロモーターを共有しているため、 GFP遺伝子はアラビノースの存在下で発現し、トランスジェニック生物はUV光の下でその蛍光を発現します。 GFPは、pGLOプラスミドを含む細菌で+アラビノースプレート上で増殖させることにより誘導できます。
アラビノースは何に使われていますか？
食品での使用
もともと甘味料として商品化されていたアラビノースは、小腸でショ糖をブドウ糖と果糖に分解する酵素であるスクラーゼの阻害剤です。この抑制効果は、げっ歯類とヒトの両方で検証されています。 GFPはどこから来たのですか？
他の多くの海洋生物も同様の緑色蛍光タンパク質を持っていますが、 GFPは伝統的に、クラゲAequoreavictoriaから最初に単離されたタンパク質avGFPを指します。 A. victoriaのGFPには、波長395 nmに大きな励起ピークがあり、475nmに小さな励起ピークがあります。
pFluoroGreenとは何ですか？
GFP遺伝子を含む緑色蛍光タンパク質を生成するプラスミドはpFluoroGreen ™です。プラスミドを取り込む細菌細胞のみが、アンピシリン寒天プレートでの選択を生き延びます。 pFluoroGreen ™を使用すると、長いUV光の下で緑色の蛍光コロニーが見えます。
なぜ遺伝的形質転換が重要なのですか？
細菌の形質転換が使用されます：DNAクローニングと呼ばれるDNAの複数のコピーを作成するため。 I型糖尿病の人々の治療に使用できる特定のヒトタンパク質、たとえばヒトインスリンを大量に製造すること。細菌または他の細胞を遺伝子組み換えすること。
GFP遺伝子の機能は何ですか？
生物学者はGFPをマーカータンパク質として使用します。 GFPは別のタンパク質に付着して蛍光でマークを付けることができるため、科学者は有機構造内の特定のタンパク質の存在を確認できます。 Gfpは、緑色蛍光タンパク質を生成する遺伝子を指します。
アラビノースはバクテリアに何をしますか？
アラビノースが環境中に存在する場合、バクテリアがそれを取り込みます。中に入ると、アラビノースはDNAに結合しているAraCと直接相互作用します。相互作用によりAraCの形状が変化し、RNAポリメラーゼがプロモーターに結合するのを助け、3つの遺伝子araB、araA、およびaraDが転写されます。
プレートIVの目的は何ですか？
NS。プレートIVの目的は何ですか？形質転換されていない細菌が抗生物質カナマイシンによって殺されることを確実にするための対照として機能します。プレートIにはLB寒天（バクテリアフード）しかなく、抗生物質が含まれていないため、非形質転換細菌と形質転換細菌の両方がプレートIで生き残ることができます。