SYBR Safeは本当に安全ですか？
質問者：ポルシェシリン|最終更新日：2020年1月20日
カテゴリ：科学生物科学
SYBRセーフ。 SYBR safeは、Invitrogenによって製造された市販のDNA染色剤です。臭化エチジウムよりも害が少ないものとして販売されていますが、これについては議論の余地があります。その主な利点は、臭化エチジウムと同じくらい感度が高いが、視覚化のために紫外線を必要としないことです。
これに関して、SYBR Greenは発がん性がありますか？安全性。 SYBR Green Iは、潜在的なヒト変異原物質である臭化エチジウムの代替品として販売されており、エチジウムの複雑な廃棄物処理の問題を回避し、安全に作業できます。ただし、 SYBR Greenを含め、DNAに高い親和性で結合できる小分子は発がん性の可能性があります。
上記のほかに、SYBR Safeは何をしますか？ SYBR Safeは、分子生物学で核酸染色剤として使用されるシアニン色素です。 SYBR Safeは、Life TechnologiesCorporationによって製造された多数のSYBR染料の1つです。 SYBRSafeはDNAに結合します。得られたDNA-色素複合体は青色光（ λmax = 509 nm）を吸収し、緑色光（ λmax = 524 nm）を放出します。
それで、SYBRはどれくらい安全ですか？
10,000希釈：1でSYBR®安全を含む1X電気泳動バッファーとプラスチック製の容器やカバーにゲルを置きます。暗所で4℃で最長1週間保管してください。
臭化エチジウムを使用した標準のトランスイルミネーターよりも、SYBRセーフを使用した青色光のトランスイルミネーターを使用する方がよいのはなぜですか？
UV光とは異なり、青色光は、DNAへの最小限の損傷を引き起こすので、あなたのDNAサンプルのためにあなたのためのより安全で優れています。 SYBRセーフDNAゲル染色の使用および青色安全イメージャ-光トランスイルミネーターは、DNAをエチジウムブロマイドで染色し、UV光に露光よりも改善クローニング効率を与えます。
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SYBR Greenの役割は何ですか？
SYBR®グリーン私はバインドがDNA塩基との間でインターカレーションによりDNA分子を二本鎖のことを一般的に使用される蛍光色素です。各増幅サイクルの最後に蛍光を測定して、増幅されたDNAの量を相対的にまたは絶対的に決定できるため、定量PCRで使用されます。
SYBR Greenの目的は何ですか？
SYBR Greenは、二本鎖DNAに対して高い親和性を持つ緑色蛍光シアニン色素です。 SYBR Greenは、アガロースゲルの染色とDNAの視覚化において、臭化エチジウムのより安全な代替品としての役割で最もよく知られています。また、定量PCRでも一般的に使用されます。
なぜEtBrは発がん性があるのですか？
EtBrは、DNAの積み重ねられた核酸塩基の間に挿入する能力があるため、変異原性があります。このため、複製や転記などのプロセスでエラーが発生しやすくなります。したがって、 etbrは発がん性と呼ばれます。
SYBR GreenがEtBrよりも毒性が低いのはなぜですか？
SYBR safeは、Invitrogenによって製造された市販のDNA染色剤です。臭化エチジウムよりも害が少ないものとして販売されていますが、これは議論の余地があります。その主な利点は、臭化エチジウムと同じくらい感度が高いが、視覚化のために紫外線を必要としないことです。プロトコル： SYBRセーフはゲル内染色としてのみ使用されます。
SYBR GreenがDNAに結合するのはなぜですか？
蛍光色素SYBRGreen Iは、 DNA二重らせんの副溝に結合します。溶液中では、結合していない色素はほとんど蛍光を発しませんが、 DNAが結合すると蛍光が大幅に増強されます。 DNA結合により、 SYBR Green I分子が劇的に増加し、励起時に発光します。
SYBRグリーンライトは敏感ですか？
SYBR Green I色素（マスターミックスに含まれる）は光に敏感です。マスターミックスを含む溶液は、可能な限り光から保護する必要があります。
臭化エチジウムに触れるとどうなりますか？
あなたはもちろんの手袋とボンネットの下にその化学で動作する必要がありますので、エチジウムブロマイド（濃縮形態〜液体）を少量にタッチすると、タッチを通して、しかし匂いを通じてだけでなく、はるかに危険です。
臭化エチジウムはなぜ毒性があるのですか？
危険。臭化エチジウムはDNAと結合できるため、変異原物質として非常に毒性があります。いずれかの健康への影響を示す科学的証拠は見つかっていませんが、発がん性または催奇形性の影響を引き起こす可能性があります。臭化エチジウムの暴露経路は、吸入、経口摂取、および皮膚吸収です。
アガロースゲルにどのくらいのDNAを入れますか？
アガロースゲルのウェルあたりどのくらいのDNAをロードする必要がありますか？ウェルごとにロードするDNAの量は可変です。臭化エチダムで検出できるDNAの最小量は10ngです。ウェルあたり最大100ngのDNA量により、エチジウムブロマイド染色ゲル上にシャープでクリーンなバンドが得られます。
DNAの量が多すぎたり少なすぎたりするとどうなりますか？
ゲルにロードされたDNAが多すぎるのは悪いことです。バンドは速くなって他のバンドのための電界まで混乱、彼らはまた、間違ったサイズを表示することができ、極端な例では（実際よりも小さくなっていることを示唆している）を実行するように見えます。
どのようにして0.8アガロースゲルを作りますか？
- 100mLの1XTAEバッファーを0.8gのUltraPureアガロースと数粒のグアノシンに加えます。
- 従来の電子レンジで1分間電子レンジで加熱し、30秒で回転させます。
- 触るのが苦痛でなくなるまで冷まし、6uLのエチジウムブロマイドを加えます。
- コームでゲルドックに注ぎ、固化させます。
SYBR Greenをどのように希釈しますか？
SYBR®グリーンI染色は、1の最終濃度でローディングバッファーに直接添加することができる：1000。高品質の無水DMSO中のSYBR®グリーンI染色：100希釈の最初の1を準備します。 1：100希釈液は冷凍庫に保存して再利用できます。ロードする前に、この希釈液の1μlをサンプルの9μl-10μlに追加します。
SYBRセーフを電子レンジで加熱できますか？
SYBR Safe DNA Gel Stainは、性能を損なうことなく短時間マイクロ波処理できます。ただし、繰り返しまたは長時間の電子レンジの効果はわかりません。
SYBRゴールドはどのようにDNAに結合しますか？
SYBR®ゴールド染色は、核酸に結合すると1000倍を超える蛍光増強を示し、二本鎖または一本鎖DNAまたはRNA 1に結合すると高い量子収率（〜0.6）を示す独自の非対称シアニン色素です。
SYBR Safeを使用してアガロースゲルでDNAを視覚化できるのはなぜですか？
危険性が低く、感度の高いDNAゲル染色
Invitrogen SYBR Safe DNA Gel Stainは、アガロースまたはアクリルアミドゲルでDNAを視覚化するための高感度染色です。 SYBRセーフステインは、青色光またはUV励起のいずれかで使用できる臭化エチジウムの危険性の低い代替品として特別に配合されています。 どのようにして2.5アガロースゲルを作りますか？
アガロース/ TAE懸濁液を電子レンジで30秒間加熱し、渦を巻いて溶解させ、アガロースが完全に溶解するまで同様に加熱します。 3.アガロースゲルを少し冷まします（加熱して溶解させたガラス瓶を保持できるようにします）。 5 ulのEtBr（10mg / ml）を加え、ボトルを回転させます。
SYBR Safeをどのように使用しますか？
1.1ゲルをSYBRSafe ™染色液に浸します。
SYBR安全™ゲル染色濃縮物を使用する場合、TAEまたはTBE中の希釈10,000は、使用前に（適宜）緩衝液。ピペットチップボックスの蓋や家庭用食品保管容器などのプラスチック容器にゲルを入れます。